(ציטומטריה זרימה, FCM) היא מנתח תאים המודד את עוצמת הקרינה של סמני תאים מוכתמים. זוהי טכנולוגיית היי-טק שפותחה על בסיס ניתוח ומיון של תאים בודדים. זה יכול למדוד במהירות ולסווג את הגודל, המבנה הפנימי, DNA, RNA, חלבונים, אנטיגנים ותכונות פיזיקליות או כימיות אחרות של תאים, ויכול להיות מבוסס על איסוף סיווגים אלה.
ציטומטר זרימה מורכב בעיקר מחמשת החלקים הבאים:
1 תא זרימה ומערכת זרימה
2 מקור אור לייזר ומערכת עיצוב קרן
3 מערכת אופטית
4 מערכת אלקטרוניקה, אחסון, תצוגה וניתוח
5 מערכת מיון תאים
ביניהם, עירור לייזר במקור האור בלייזר ובמערכת גיבוש קרן הוא המדידה העיקרית של אותות הקרינה בציטומטריה זרימה. עוצמת אור העירור וזמן החשיפה קשורים לעוצמת האות הקרינה. לייזר הוא מקור אור קוהרנטי שיכול לספק תאורה באורך גל יחיד, בעצימות גבוהה ויציבות גבוהה. זהו מקור אור העירור האידיאלי לעמוד בדרישות אלה.
ישנן שתי עדשות גליליות בין מקור הלייזר לתא הזרימה. עדשות אלה ממקדות קרן לייזר עם חתך רוחב מעגלי הנפלט ממקור הלייזר לקורה אליפטית עם חתך רוחב קטן יותר (22 מיקרומטר × 66 מיקרומטר). אנרגיית הלייזר בתוך קרן אליפטית זו מופצת על פי התפלגות נורמלית, ומבטיחה עוצמת תאורה עקבית לתאים העוברים באזור גילוי הלייזר. מצד שני, המערכת האופטית מורכבת ממערכות מרובות של עדשות, חורים ומסננים, שניתן לחלק אותם בערך לשתי קבוצות: במעלה הזרם והזרם של תא הזרימה.
המערכת האופטית מול תא הזרימה מורכבת מעדשה וחור חור. הפונקציה העיקרית של העדשה והחור (בדרך כלל שתי עדשות ובור חור) היא למקד את קרן הלייזר עם חתך מעגלי שנפלט על ידי מקור הלייזר לקרן אליפטית עם חתך קטן יותר. זה מפיץ את אנרגיית הלייזר על פי התפלגות נורמלית, ומבטיח עוצמת תאורה עקבית לתאים ברחבי שטח הגילוי בלייזר ומצמצם את ההפרעות מאור תועה.
ישנם שלושה סוגים עיקריים של פילטרים:
1: מסנן מעבר ארוך (LPF) - מאפשר רק אור עם אורכי גל גבוהים מערך ספציפי לעבור.
2: מסנן מעבר קצר (SPF) - מאפשר רק אור עם אורכי גל מתחת לערך ספציפי לעבור.
3: פילטר פס פס (BPF) - מאפשר רק אור בטווח אורך גל ספציפי לעבור.
שילובים שונים של פילטרים יכולים לכוון אותות פלואורסצנט באורכי גל שונים לצינורות פוטו -מכפילים בודדים (PMTs). לדוגמה, פילטרים לגילוי פלואורסצנט ירוק (FITC) מול PMT הם LPF550 ו- BPF525. המסננים המשמשים לאיתור פלואורסצנט אדום כתום (PE) מול ה- PMT הם LPF600 ו- BPF575. המסננים לגילוי פלואורסצנט אדום (CY5) מול ה- PMT הם LPF650 ו- BPF675.
ציטומטריה זרימה משמשת בעיקר למיון תאים. עם קידום טכנולוגיית המחשבים, פיתוח האימונולוגיה והמצאת טכנולוגיית הנוגדנים המונוקלונליים, יישומי הביולוגיה, הרפואה, הרוקחות ותחומים אחרים הופכים לרווחים יותר ויותר. יישומים אלה כוללים ניתוח דינמיקה של תאים, אפופטוזיס תאים, הקלדת תאים, אבחנת גידולים, ניתוח יעילות תרופות וכו '.
זמן ההודעה: ספטמבר -21-2023
