(Flow cytometry, FCM) הוא מנתח תאים המודד את עוצמת הקרינה של סמני תאים מוכתמים. זוהי טכנולוגיית היי-טק שפותחה על בסיס ניתוח ומיון של תאים בודדים. הוא יכול למדוד ולסווג במהירות את הגודל, המבנה הפנימי, ה-DNA, ה-RNA, החלבונים, האנטיגנים ותכונות פיסיקליות או כימיות אחרות של תאים, והוא יכול להתבסס על אוסף הסיווגים הללו.
ציטומטר זרימה מורכב בעיקר מחמשת החלקים הבאים:
1 תא זרימה ומערכת נוזלים
2 מקור אור לייזר ומערכת עיצוב קרן
3 מערכת אופטית
4 מערכת אלקטרוניקה, אחסון, תצוגה וניתוח
מערכת מיון 5 תאים
ביניהם, עירור לייזר במקור אור הלייזר ובמערכת ליצירת קרן היא המדידה העיקרית של אותות הקרינה ב-flow cytometry. עוצמת אור העירור וזמן החשיפה קשורים לעוצמת אות הקרינה. לייזר הוא מקור אור קוהרנטי שיכול לספק תאורה באורך גל בודד, בעוצמה גבוהה וביציבות גבוהה. זהו מקור אור העירור האידיאלי לעמוד בדרישות אלה.
ישנן שתי עדשות גליליות בין מקור הלייזר לתא הזרימה. עדשות אלו ממקדות קרן לייזר בעלת חתך עגול הנפלט ממקור הלייזר לקרן אליפטית בעלת חתך קטן יותר (22 מיקרומטר × 66 מיקרומטר). אנרגיית הלייזר בתוך קרן אליפטית זו מופצת לפי חלוקה נורמלית, מה שמבטיח עוצמת תאורה עקבית לתאים העוברים דרך אזור זיהוי הלייזר. מצד שני, המערכת האופטית מורכבת ממספר קבוצות של עדשות, חורים ומסננים, אותם ניתן לחלק באופן גס לשתי קבוצות: במעלה הזרם ומורד הזרם של תא הזרימה.
המערכת האופטית בחזית תא הזרימה מורכבת מעדשה וחור חריר. תפקידם העיקרי של העדשה והחור (בדרך כלל שתי עדשות וחור חריר) הוא למקד את קרן הלייזר בחתך עגול הנפלט ממקור הלייזר לקרן אליפטית בעלת חתך קטן יותר. זה מפיץ את אנרגיית הלייזר לפי חלוקה נורמלית, מה שמבטיח עוצמת תאורה עקבית לתאים על פני אזור זיהוי הלייזר וממזער הפרעות מאור תועה.
ישנם שלושה סוגים עיקריים של מסננים:
1: מסנן מעבר ארוך (LPF) - מאפשר רק לאור עם אורכי גל גבוהים מערך מסוים לעבור דרכו.
2: מסנן מעבר קצר (SPF) - מאפשר רק לאור עם אורכי גל מתחת לערך מסוים לעבור דרכו.
3: מסנן פס-פס (BPF) - מאפשר רק לאור בטווח אורכי גל מסוים לעבור דרכו.
שילובים שונים של מסננים יכולים להפנות אותות פלואורסצנטי באורכי גל שונים לצינורות פוטו-מכפיל (PMT) בודדים. לדוגמה, מסננים לזיהוי פלואורסצנטי ירוק (FITC) מול PMT הם LPF550 ו-BPF525. המסננים המשמשים לזיהוי פלואורסצנטי כתום-אדום (PE) מול ה-PMT הם LPF600 ו-BPF575. המסננים לזיהוי הקרינה האדומה (CY5) מול ה-PMT הם LPF650 ו-BPF675.
ציטומטריית זרימה משמשת בעיקר למיון תאים. עם התקדמות טכנולוגיית המחשוב, התפתחות האימונולוגיה והמצאת טכנולוגיית נוגדנים חד שבטיים, יישומיה בביולוגיה, רפואה, רוקחות ותחומים נוספים הופכים נפוצים יותר ויותר. יישומים אלה כוללים ניתוח דינמיקה של תאים, אפופטוזיס של תאים, הקלדת תאים, אבחון גידול, ניתוח יעילות תרופות וכו'.
זמן פרסום: 21 בספטמבר 2023
